TALEN (nuclease effectrice de type activateur de transcription) :
- Le domaine de reconnaissance est basé sur des protéines présentes dans les bactéries Xanthomonas et qui sont modifiées pour ces ciseaux génétiques
- La longueur de la séquence cible peut être choisie librement
- Plus précis que les systèmes CRISPR-Cas, car la protéine trouve la séquence cible avec plus de précision que l’ARN guide ; plus la séquence cible est longue, plus la précision est grande.
Comme pour les autres procédés d’édition génomique, TALEN vise à modifier l’ADN (ou la séquence d’ADN) à des endroits spécifiques en insérant, supprimant ou remplaçant certaines sections d’ADN.
La technique TALEN repose également sur l’utilisation de nucléases programmées pour trouver des séquences d’ADN cibles spécifiques et y couper le brin d’ADN. La rupture du double brin déclenche un mécanisme de réparation propre à la cellule.
Le principe de fonctionnement est similaire à celui des doigts de zinc : les TALEN sont également constitués d’une séquence de modules qui se lient ensemble à une séquence. Chaque module est constitué de la même séquence d’acides aminés, qui ne diffère des autres variantes qu’à un endroit très spécifique : le site de liaison à l’ADN, qui est spécifique à une seule paire de bases. Une section TALEN synthétique se lie précisément à la séquence qui correspond à sa séquence modulaire. Les constructions ainsi obtenues, composées d’une séquence de reconnaissance et d’une enzyme, sont utilisées par paires, de sorte que l’on obtient la construction TALE-nuclease-TALE sur le brin d’ADN. La nucléase coupe le génome à l’endroit situé entre les deux séquences de reconnaissance.
Par rapport aux nucléases à doigt de zinc, la méthode TALEN est plus facile à utiliser. Elle est également considérée comme plus précise que les systèmes CRISPR-Cas, car les protéines utilisées dans TALEN trouvent mieux la séquence cible que l’ARN guide utilisé dans CRISPR. Les effets hors cible seraient également moins fréquents avec TALEN qu’avec les systèmes ZFN et CRISPR-Cas.
