Sequenzierung des Erbguts der verwendeten Pflanzenlinien. Bild: Shutterstock
(Image: Muffet / Wikimedia Commons)

Succès dans les méthodes de détection des nouvelles technologies génétiques

Depuis jan­vier 2021, des cher­cheurs de l’In­sti­tut Leib­niz de géné­tique végé­ta­le et de recher­che sur les plan­tes cul­ti­vées (IPK) et de l’Uni­ver­si­té Chri­sti­an-Albrecht de Kiel ont cher­ché des appro­ches pour la détec­tion et l’i­den­ti­fi­ca­ti­on des plan­tes dont le géno­me a été modi­fié par les nou­vel­les tech­ni­ques géno­mi­ques (NTG) ; ils ont aus­si testé leur uti­li­sa­ti­on pra­tique. Au cours des trois années qu’a duré le pro­jet, les cher­cheurs ont réus­si à déve­lo­p­per des métho­des d’ana­ly­se per­met­tant de détec­ter des muta­ti­ons — con­nues aupa­ra­vant — dans des lig­nées NTG. En out­re, des indi­ces d’u­ne appro­che ana­ly­tique qui pour­rait — dans cer­ta­ins cas — être uti­li­sée pour iden­ti­fier les lig­nées NTG en tant que tel­les, c’est-à-dire pour les distin­guer d’u­ne lig­née con­ven­ti­on­nel­le pré­sen­tant la même muta­ti­on, ont été con­fir­més au cours du pro­jet de recher­che, écri­vent les cher­cheurs. Les expé­ri­en­ces ont été menées en système fer­mé, sans dis­sé­mi­na­ti­on.

Le pro­jet est par­ti de lig­nées d’or­ge et de colza dans le patri­moi­ne géné­tique des­quel­les les cher­cheurs des insti­tuts par­ti­ci­pan­ts ont intro­duit de maniè­re ciblée de peti­tes modi­fi­ca­ti­ons (muta­ti­ons) à l’ai­de des cise­aux géné­ti­ques CRISPR/Cas. Pour la détec­tion des muta­ti­ons, des appro­ches basées sur les pro­cé­dés de réac­tion en chaî­ne par poly­mé­ra­se (PCR) et de séquen­ça­ge de nou­vel­le géné­ra­ti­on (NGS) ont été testées. Pour l’i­den­ti­fi­ca­ti­on, les cher­cheurs ont sui­vi l’appro­che con­si­stant à uti­li­ser d’aut­res muta­ti­ons dans le patri­moi­ne géné­tique des lig­nées NTG qui se trou­vent à pro­xi­mi­té de la muta­ti­on induite et qui ne sont pas pré­sen­tes dans les lig­nées de com­pa­rai­son.

Pour les lig­nées d’or­ge et de colza étu­diées, deux métho­des d’ana­ly­se ont pu être éta­b­lies, qui ont per­mis de détec­ter de maniè­re fia­ble les muta­ti­ons intro­dui­tes, même dans des mélan­ges de semen­ces con­tenant seu­le­ment des quan­ti­tés de 0,9% et 0,1%. Les labo­ra­toires de réfé­rence accré­di­tés par­ti­ci­pant au pro­jet ont opti­mi­sé les métho­des et les ont testées avec suc­cès en ter­mes de spé­ci­fi­ci­té, de sélec­ti­vi­té et d’ap­pli­ca­bi­li­té.

Pro­cé­du­res de détec­tion et d’i­den­ti­fi­ca­ti­on requi­ses pour les con­trô­les offi­ci­els
Les plan­tes dont le patri­moi­ne géné­tique a été modi­fié à l’ai­de de nou­vel­les tech­no­lo­gies géné­ti­ques (NTG) sont actu­el­le­ment sou­mi­ses à la régle­men­ta­ti­on sur les orga­nis­mes géné­ti­quement modi­fi­és (OGM) dans l’UE et en Suis­se. Pour le con­trô­le du mar­ché et com­me con­di­ti­on pré­alable à la mise en cir­cula­ti­on d’OGM, il est néces­saire de dis­po­ser de métho­des de détec­tion et d’i­den­ti­fi­ca­ti­on fia­bles pour le con­trô­le offi­ci­el afin de pou­voir distin­guer les pro­duits issus de l’é­di­ti­on du géno­me des pro­duits de cul­tu­re clas­si­ques — c’est-à-dire de les iden­ti­fier sans équi­vo­que. Les métho­des de détec­tion des OGM dis­po­ni­bles jus­qu’à pré­sent, qui per­met­tent de détec­ter des séquen­ces d’ADN étran­gè­res con­nues, ne peu­vent être appli­quées que de maniè­re limi­tée aux plan­tes NTG qui ne con­ti­en­nent pas de tel­les séquen­ces d’ADN.
Cepen­dant, l’é­tu­de mont­re que l’in­ter­ven­ti­on qui doit être recher­chée doit être docu­men­tée et con­nue avec pré­cis­i­on. Pour s’en assurer, les ent­re­pri­ses qui sou­hai­tent com­mer­cia­li­ser des plan­tes NTG dev­rai­ent être obli­gées de mett­re à dis­po­si­ti­on des auto­ri­tés de con­trô­le des infor­ma­ti­ons sur le patri­moi­ne géné­tique et du maté­ri­el de réfé­rence, écrit le ser­vice d’in­for­ma­ti­on sur le génie géné­tique. Selon la situa­ti­on juri­di­que actu­el­le, elles ne sont obli­gées de le fai­re que si elles deman­dent une auto­ri­sa­ti­on pour leur plan­te dans l’UE ou en Suis­se. C’est pour­quoi il est actu­el­le­ment dif­fi­ci­le pour les auto­ri­tés de déve­lo­p­per des métho­des de test, de détec­tion et d’i­den­ti­fi­ca­ti­on pour quat­re plan­tes NTG qui sont déjà com­mer­cia­li­sées en dehors de l’Eu­ro­pe.

L’é­tu­de actu­el­le, com­man­dée par l’Of­fice fédé­ral alle­mand de l’ag­ri­cul­tu­re et de l’a­li­men­ta­ti­on, mont­re que la détec­tion et l’i­den­ti­fi­ca­ti­on des plan­tes NTG seront pos­si­bles à l’a­ve­nir, à con­di­ti­on que les pro­jets de recher­che cor­re­spond­ants soi­ent lan­cés et encou­ra­gés. Refu­ser de régle­men­ter les nou­veaux pro­cé­dés de génie géné­tique sous pré­tex­te que leur détec­tion est trop dif­fi­ci­le, voi­re impos­si­ble, com­me l’af­fir­ment con­stam­ment l’in­du­strie agri­co­le et une par­tie des milieux sci­en­ti­fi­ques et poli­ti­ques qui lui sont liés, n’est donc plus défen­da­ble en tou­te bon­ne con­sci­ence.

For­schen­de des Leib­niz-Insti­tuts für Pflan­zen­genetik und Kul­tur­pflan­zen­for­schung (IPK) und der Chri­sti­an-Albrechts-Uni­ver­si­tät zu Kiel such­ten seit Janu­ar 2021 nach Ansät­zen für den Nach­weis und die Iden­ti­fi­zie­rung von Pflan­zen aus neu­er Gen­tech­nik (NGT) und prüf­ten die­se auf ihre prak­ti­sche Ein­satz­fä­hig­keit. In den rund drei Jah­re dau­ern­den Pro­jekt­pha­se ist es den For­schen­den gelun­gen, Ana­ly­se­ver­fah­ren zu ent­wickeln, mit denen Muta­tio­nen — die zuvor bekannt waren — in NGT-Lini­en nach­ge­wie­sen wer­den kön­nen. Zudem hät­ten sich im Lau­fe des For­schungs­pro­jek­tes Hin­wei­se auf einen ana­ly­ti­schen Ansatz bestä­tigt, der – in bestimm­ten Fäl­len – her­an­ge­zo­gen wer­den könn­te, um NGT-Lini­en als sol­che zu iden­ti­fi­zie­ren, sie also von einer kon­ven­tio­nel­len Linie mit der­sel­ben Muta­ti­on zu unter­schei­den, schrei­ben die For­schen­den. Die Expe­ri­men­te fan­den im geschlos­se­nen System ohne Frei­set­zung statt.

Aus­gangs­punkt für das Pro­jekt waren Ger­sten- und Raps­li­ni­en, in deren Erb­gut die For­schen­de der betei­lig­ten Insti­tu­te mit der Gen­sche­re CRISPR/ Cas gezielt klei­ne Ver­än­de­run­gen (Muta­tio­nen) ein­ge­bracht hat­ten. Für den Nach­weis der Muta­tio­nen wur­den Ansät­ze erprobt, die auf Ver­fah­ren der Poly­me­ra­se-Ket­ten­re­ak­ti­on (PCR) und des Next Gene­ra­ti­on Sequen­cing (NGS) basie­ren. Zur Iden­ti­fi­zie­rung ver­folg­ten die For­schen­den den Ansatz, wei­te­re Muta­tio­nen im Erb­gut der NGT-Lini­en her­an­zu­zie­hen, die in der Nähe der indu­zier­ten Muta­ti­on lie­gen und in Ver­gleichs­li­ni­en nicht vor­han­den sind.

Für die unter­such­ten Ger­sten- und Raps­li­ni­en konn­ten jeweils zwei Ana­ly­se­ver­fah­ren eta­bliert wer­den, die den zuver­läs­si­gen Nach­weis der ein­ge­brach­ten Muta­tio­nen, auch in Saat­gut­mi­schun­gen mit nur 0,9% und 0,1% Men­gen­an­teil, erlaub­ten. Am Pro­jekt betei­lig­te akkre­di­tier­te Refe­renz­la­bo­re opti­mier­ten die Ver­fah­ren und teste­ten sie erfolg­reich auf Spe­zi­fi­tät, Selek­ti­vi­tät und Anwend­bar­keit.

Für bestimm­te Raps- und Ger­sten­li­ni­en aus neu­er Gen­tech­nik wur­de ein zuver­läs­si­ges Ver­fah­ren ent­wickelt, um geziel­te Muta­tio­nen im Erb­gut nach­zu­wei­sen – auch bei gerin­gem Anteil in Saat­gut­mi­schun­gen. Bild: SAG

Nach­weis- und Iden­ti­fi­zie­rungs­ver­fah­ren für die amt­li­che Kon­trol­len benö­tigt

Pflan­zen, deren Erb­gut mit­hil­fe neu­er Gen­tech­ni­ken ver­än­dert wur­de, fal­len in der EU und auch in der Schweiz aktu­ell unter die Regu­lie­run­gen für gen­tech­nisch ver­än­der­te Orga­nis­men (GVO). Für die Markt­kon­trol­le und als Vor­aus­set­zung für das Inver­kehr­brin­gen von GVO wer­den gerichts­fe­ste Nach­weis- und Iden­ti­fi­zie­rungs­ver­fah­ren für die amt­li­che Kon­trol­le benö­tigt, die erlau­ben, Pro­duk­te der NGT von klas­si­schen Züch­tungs­pro­duk­ten ein­deu­tig zu unter­schei­den. Bis­her ver­füg­ba­re Ver­fah­ren zum Nach­weis von GVO, mit denen bekann­te Fremd-DNA-Sequen­zen detek­tiert wer­den, kön­nen nur ein­ge­schränkt auf geno­me­di­tier­te Pflan­zen, die kei­ne sol­chen DNA-Sequen­zen ent­hal­ten, über­tra­gen wer­den.

Aller­dings zeigt die Stu­die, dass der jewei­li­ge NGT-Ein­griff, nach dem gesucht wer­den soll, genau doku­men­tiert und bekannt sein muss. Um dies sicher­zu­stel­len, müss­ten Unter­neh­men, die NGT-Pflan­zen ver­mark­ten wol­len, dazu ver­pflich­tet wer­den, Erb­gut­in­for­ma­tio­nen und Refe­renz­ma­te­ri­al den Kon­troll­be­hör­den zur Ver­fü­gung zu stel­len, schreibt der Infor­ma­ti­ons­dienst Gen­tech­nik. Nach aktu­el­ler Rechts­la­ge sind sie dazu nur ver­pflich­tet, wenn sie in der EU oder in der Schweiz eine Zulas­sung für ihre Pflan­ze bean­tra­gen. Daher ist es für die Behör­den aktu­ell schwie­rig Test­ver­fah­ren für vier NGT-Pflan­zen, die aus­ser­halb Euro­pas bereits ver­mark­tet wer­den, Nach­weis- und Iden­ti­fi­zie­rungs­ver­fah­ren zu ent­wickeln.

Die aktu­el­le Stu­die, die das deut­sche Bun­des­amt für Land­wirt­schaft und Ernäh­rung in Auf­trag gege­ben hat­te, zeigt, dass der Nach­weis und die Iden­ti­fi­zie­rung von NGT-Pflan­zen zukünf­tig mach­bar sein wer­den, sofern ent­spre­chen­de For­schungs­pro­jek­te in die Wege gelei­tet und geför­dert wer­den. Eine Regu­lie­rung der neu­en gen­tech­ni­scher Ver­fah­ren mit dem Argu­ment abzu­leh­nen, dass deren Nach­weis zu schwie­rig oder gar unmög­lich sei, wie dies die Agrar­in­du­strie und Tei­le der mit die­ser ver­ban­del­ten Wis­sen­schaft und Poli­tik stets beteu­ern, ist folg­lich mit gutem Gewis­sen nicht mehr halt­bar.

  • Mach­bar­keits­stu­die zu “Nach­weis- und Iden­ti­fi­zie­rungs­ver­fah­ren für geno­me­di­tier­te Pflan­zen und pflanz­li­che Pro­duk­te“ abge­schlos­sen: Bun­des­an­stalt für Land­wirt­schaft und Ernäh­rung

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